AZD 6482

MCE 国际站：AZD 6482

品牌：MedChemExpress (MCE)

CAS：1173900-33-8

货号：HY-10344

Synonyms：KIN-193

纯度：0.9993

存储条件：粉末 -20°C 3 年 4°C 2 年溶剂中 -80°C 2 年 -20°C 1 年

运输条件：美国大陆的室温；其他地方可能有所不同。

产品活性：AZD 6482 (KIN-193) 是一种有效的选择性 p110β 抑制剂，IC50 为 0.69 nM。

体外：体外激酶试验表明，AZD 6482 (KIN-193) 可有效抑制 p110β 激酶活性 (IC50 为 0.69 nM)，对 p110α、p110δ 和 p110γ 异构体的选择性分别为 200、20 和 70 倍。AZD 6482 对 PI3K-C2β 和 DNA-PK 的选择性约为 80 倍，对其他磷脂酰肌醇-3 激酶相关激酶 (PIKK) 的选择性超过 1,000 倍。使用 KinomeScan 方法对 AZD 6482 与 433 种激酶的抑制剂-激酶相互作用进行分析，结果表明 AZD 6482 与 PI3K 的相互作用具有高度选择性。为了确定 AZD 6482 是否选择性靶向 PTEN 缺陷型肿瘤，我们利用高通量肿瘤细胞系分析法，在 422 个癌细胞系的大样本组中测试了 AZD 6482 对细胞增殖的影响。35% 的 PTEN 突变细胞系（57 个中的 20 个）和 16% 的野生型 PTEN 细胞系（365 个中的 58 个）对 AZD 6482 敏感，阈值为 EC50[1]。MCE 尚未独立证实这些方法的准确性。它们仅供参考。

体内：为了确定 AZD 6482 (KIN-193) 在体内肿瘤中的药效学，对大鼠成纤维细胞 (Rat1) 进行改造，使其同时表达 p53DD（p53 的显性负突变体）和组成性激活的 myr-p110β (Rat1-CA-p110β)，以使这些细胞能够在小鼠体内形成异种移植肿瘤。为了进行比较，还生成了表达 p53DD 和 myr-p110α (Rat1-CA-p110α) 的同源 Rat1 细胞系。将 Rat1-CA-p110α 和 Rat1-CA-p110β 细胞皮下植入无胸腺小鼠的对侧侧腹，这样由激活的 p110α 或 p110β 驱动的肿瘤将暴露于相同的条件，并且可以消除对动物间差异的担忧。当肿瘤体积达到~500 mm3时，荷瘤小鼠接受单次腹腔注射AZD 6482（10 mg/kg）。AZD 6482的血浆浓度在注射后1小时达到最高，并在4小时后降至不可检测的水平。CA-p110α和CA-p110β驱动的肿瘤中AZD 6482的浓度与血浆浓度一致。对AZD 6482注射后不同时间点收获的肿瘤裂解物的分析表明，在Rat1-CA-p110β肿瘤中，注射AZD 6482 1小时后AKT的磷酸化显著降低，但在Rat1-CAp110α肿瘤中保持不变[1]。MCE尚未独立证实这些方法的准确性。它们仅供参考。

动物实验：小鼠[1] 给大约 6-8 周大的雌性裸鼠进行皮下注射，在一侧胁腹（部位 1）注射 Rat1-Myr-HA-p110α（Rat1-CAp110α）细胞（40% 基质胶中 1×106 个细胞），在对侧胁腹（部位 2）注射 Rat1-Myr-HA-p110β（Rat1-CAp110β）细胞（10% 基质胶中 0.5×106 个细胞）。当肿瘤长到 ~500 mm3 时，给小鼠进行一次腹腔注射 AZD 6482，该药物以 0.1 mL/10g 体重和 10 mg/kg 的剂量配制在 7.5% NMP、40% PEG400、52.5% dH2O 中。给药后0、1、4、8、24小时采集肿瘤，通过心脏直接穿刺采集血液样本，分离血清并储存于-80°C。血清和肿瘤样本中的药物浓度由DMPK小组通过LC-MS/MS分析评估。MCE尚未独立证实这些方法的准确性。仅供参考。

细胞实验：确定细胞活力。简而言之，将细胞接种在含有 5% FBS 的培养基中，接种密度应确保在药物治疗期间细胞生长（大多数细胞系约为 15%）。接种后 24 小时开始药物治疗，持续 72 小时。细胞固定后用红色荧光 DNA 染料 Syto60 染色。相对细胞数是通过在背景减去后取药物处理孔与未处理孔（无细胞孔）的相对荧光强度比来计算的。9 种剂量的 AZD 6482 (KIN-193) 以 2 倍稀释步骤使用，范围从 5.12 µM 到 0.02 µM。IC50 对应于与对照（未处理）孔相比 50% 的细胞数，使用 PipelinePilot[1] 中实现的固定顶部和底部 S 形拟合算法确定。MCE 尚未独立证实这些方法的准确性。它们仅供参考。

激酶实验：AZD 6482 (KIN-193) 在浓度为 10 µM 时针对 433 种不同的激酶组进行分析。初步筛选命中的分数以 DMSO 对照 (% 对照) 的百分比报告。对于未显示分数的激酶，未检测到可测量的结合。分数越低，Kd 可能越低，因此分数为零表示强命中。分数与命中概率有关，但严格来说不是亲和力测量。在 10 µM 的筛选浓度下，分数小于 10% 意味着假阳性概率小于 20%，Kd 最有可能小于 1 µM。1-10% 之间的分数意味着假阳性概率小于 10%，尽管很难从单点初步筛选中确定定量亲和力。分数小于 1% 表示假阳性概率小于 5%，Kd 很可能小于 1 µM[1]。MCE 尚未独立确认这些方法的准确性。它们仅供参考。

IC50 & Target：PI3Kβ 0.69 nM (IC50) PI3Kδ 13.6 nM (IC50) PI3Kγ 47.8 nM (IC50) PI3Kα 136 nM (IC50) PI3K-C2β 54.1 nM (IC50) hVps34 3390 nM (IC50) DNA-PK 53.7 nM (IC50) mTOR 3930 nM (IC50) PI4Kα 8830 nM (IC50) Autophagy

参考文献：

[1]. Ni J, et al. Functional characterization of an isoform-selective inhibitor of PI3K-p110β as a potential anticancer agent. Cancer Discov. 2012 May;2(5):425-33.

品牌介绍:
•   MCE (MedChemExpress) 拥有200 多种全球独家化合物库，我们致力于为全球科研客户提供前沿最全的高品质小分子活性化合物；
•   50,000 多种高选择性抑制剂、激动剂涉及各热门信号通路及疾病领域；
•   产品种类涵盖各种重组蛋白，多肽，常用试剂盒，更有 PROTAC、ADC 等特色产品，广泛应用于新药研发、生命科学等科研项目；
•   提供虚拟筛选，离子通道筛选，代谢组学分析检测分析，药物筛选等专业技术服务；
•   设有专业的实验中心和严格的质控、验证体系；
•   提供 LC/MS、NMR、HPLC、手性分析、元素分析等各项质检报告，确保产品的高纯度、高品质；
•   产品的生物活性多经各国客户实验验证；
•   Nature, Cell, Science 等多种顶级期刊及制药专利收录了MCE客户的科研成果；
•   专业团队跟踪最新的制药及生命科学研究进展，为您提供全球最新的活性化合物；
•   与世界各大制药公司及知名科研机构建立了长期的合作。