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Activity-Based Protein Profiling(ABPP)技术原理详解

Activity-Based Protein Profiling(ABPP)技术原理详解

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产品名称: Activity-Based Protein Profiling(ABPP)技术原理详解

英文名称: The Working Principle of Activity-Based Protein Profiling (ABPP) Explained

产品编号: activity-based-protein-profiling-zh15

产品价格: 询价

产品产地: 中国北京

品牌商标: 百泰派克生物科技

更新时间: 2025-06-23T12:31:34

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Activity-Based Protein Profiling(ABPP),即“基于活性位点的蛋白质谱技术”,是一种聚焦蛋白质活性状态、实现功能蛋白高通量识别与定量的先进技术。它是连接“蛋白存在”与“蛋白在起作用”的关键桥梁,尤其在酶类蛋白研究、靶点发现、药物筛选等方面展现出强大潜力。

 

一、什么是ABPP?

ABPP(Activity-Based Protein Profiling)是一种功能蛋白组学方法,基于小分子活性探针与酶类蛋白活性位点之间的特异性共价反应,实现对“处于活性状态的蛋白质”的富集、鉴定与定量。与蛋白质组学不同,ABPP不关注所有蛋白,而专注于:

1、正在执行生物功能的“活性蛋白”;

2、特定酶类家族(如蛋白酶、磷酸酶、HDAC等);

3、与疾病发生、信号通路调控密切相关的动态分子。

 

二、ABPP技术原理解析

ABPP的核心在于“活性位点探针”对活性酶的特异性捕捉,具体工作机制包括以下三个核心组成部分:

1、活性探针(Activity-Based Probe, ABP)

探针是ABPP的“武器”,由三部分组成:

 

 

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探针设计需针对不同酶类定制,确保特异性和稳定性。例如,丝氨酸酶常用FP类探针,半胱氨酸酶常用vinyl sulfone类探针。

 

2、探针与酶结合机制

(1)探针进入样本后,仅与活跃酶的催化位点发生共价反应;

(2)非活性形式(如酶原、抑制状态酶)不会被标记;

(3)标记后的酶可用于后续捕获和质谱检测。

这种共价反应是选择性与稳定性并重的核心化学事件,使ABPP得以实现“状态识别而非简单识别”。

 

3、富集与检测流程

标记完成后,通过如下流程实现高通量分析:

(1)使用链霉亲和磁珠(生物素标签)或点击化学连接物富集活性酶;

(2)蛋白酶解(如胰蛋白酶处理);

(3)进入质谱(LC-MS/MS)系统进行肽段鉴定和定量;

(4)得到活性蛋白谱图,并可进行多组样本的对比分析。

 

三、ABPP的技术优势

 

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四、ABPP技术应用场景广泛

ABPP已在以下研究方向中发挥关键作用:

  • 疾病机制研究:绘制肿瘤、神经退行性疾病中酶类活性图谱
  • 药物开发与筛选:评估候选分子对目标酶的抑制效果及脱靶风险
  • 靶点验证与筛查:在复杂体系中识别真正的“功能性”靶点
  • 生物标志物发现:基于活性差异寻找早期诊断或分型指标

百泰派克生物科技ABPP技术平台服务能力

百泰派克生物科技已建立覆盖从探针设计到质谱解析的ABPP一站式服务平台,可广泛适用于人源样本、动物模型、细胞系等多类型研究。

我们提供:

1、活性探针库构建与筛选(支持酶类特异性定制)

2、探针标记+磁珠富集+酶解质谱全流程服务

3、Orbitrap Exploris 480平台质谱分析,高通量+高灵敏度

4、提供活性蛋白谱图、靶点变化趋势、通路富集报告

百泰派克致力于帮助科研团队挖掘蛋白质“活性层面”的信息,为靶点开发与机制研究提供更具价值的解决方案。无论是研究疾病机制,还是开发精准药物,ABPP都能为研究者提供更真实、更有用的数据支撑。如果您希望开展基于ABPP的蛋白活性研究、功能靶点筛选或小分子验证,欢迎联系百泰派克生物科技,我们将为您提供高标准、高效率的技术服务,助力科研更进一步。

 

百泰派克生物科技特色项目

 

一、蛋白测序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos质谱仪及岛津公司埃德曼降解测序系统对蛋白质序列进行分析,提供基于质谱的蛋白测序分析服务,包括对蛋白质的氨基酸组成分析,N端测序,C端测序和全序列分析,以及基于埃德曼降解的蛋白质N端序列分析服务。对于未知理论序列的蛋白质,提供基于从头测序法的蛋白质从头测序服务,对蛋白序列进行分析。

 

※服务优势:

1.采用目前世界上先进的质谱仪器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可实现对所测定靶蛋白序列 100% 的覆盖;

3.可测定蛋白N端多达 70个氨基酸序列;

4.可测定多种形式的样品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白条带;

5.样品用量低: 蛋白样品仅需 5-10ug,即可完成检测;

6.测序不受N端封闭,PEC和和糖基化等N端修饰的影响。

 

 

二、蛋白质组学

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos质谱平台结合Nano-LC,提供定量蛋白质组学、靶向蛋白质组学、多肽组学、翻译后修饰蛋白组学等多种蛋白质组学分析服务。此外,百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4D蛋白质组学服务,助力微量样本蛋白组学、大样本群医学及高通量修饰组学等研究工作。

 

※服务优势:

1 .高通量定量蛋白分析:多对照组大规模实验分析,发现新的生物标记物;

2.体内体外多种蛋白质标记方法,适用于分析组织、细胞、血液等多种样品;

3.质谱分析灵敏度高,实验结果重复度高;

4.可检测较低丰度蛋白,线性范围广;

5.专业生物信息学分析,分析更系统准确。

 

 

三、单细胞质谱流式技术分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm质谱流式系统进行单细胞质谱流式技术分析,采用金属元素标记物(通常是金属元素标记的特异抗体)标记细胞表面和内部的分子,然后用流式细胞原理分离单个细胞,再用电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)分析单个细胞的原子质量谱,最后将原子质量谱数据转换为细胞表面和内部的信号分子表达量。

 

※服务优势:

1.技术先进,填补技术空白

采用金属标记抗体技术,避免了传统流式荧光通道少且易相互影响的问题。可在单细胞层面上对多种指标同时进行表征,百泰派克生物科技可做到同时检测51个目标蛋白。

2.分析数量大,成本较低

单细胞RNAseq受成本等因素限制,所有样本细胞汇总的分析数目一般在2x10^4个左右,而流式质谱技术一次(单样本)就可分析至少10^5的细胞,实现了数量级的提高,且成本不高于单细胞RNAseq。

3.应用前景大

①流式质谱结果可以给出细胞亚群的变化,在临床诊断、疾病机制研究等方面具有极大的研究前景;

②将金属标签技术与其他技术结合会有新应用方向。除常规蛋白外,质谱流式细胞技术还可用于蛋白翻译后修饰;

③可检测细胞存活率、细胞大小、mRNA转录子表达量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

 

 

四、基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现

百泰派克生物科技的基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现一站式解决方案包括我们专有的、高度敏感的免疫肽富集和鉴定方案。我们能够帮助您实现10,000个以上I型多肽和10,000个以上II型多肽的鉴定和识别。通过我们优化的高通量免疫多肽组学分析平台进行免疫肽组学分析,可从最小的样品材料中进行可重复的识别和定量。该服务可以应用于大规模的研究,旨在助力科研工作者寻找癌症、免疫疾病及传染病的解决方案,深入挖掘未知的靶标。

 

 

五、生物药物表征

百泰派克基于高分辨率质谱技术,MALDI TOF,高效色谱分离技术,提供一系列完善的生物药物分析方案,从蛋白质、多肽、抗体、疫苗等生物制品的氨基酸组成和一级结构分析,到产品变异性和纯度分析。旨在提供优质生物药物分析服务,帮助生物医药生产商提高生物药物品质。

 

 

百泰派克生物科技七大检测平台

 

 

 

百泰派克生物科技-生物制品表征,生物质谱多组学优质服务商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于为生物/制药和医疗器械行业提供质量控制检测和项目验证等专业服务。公司实验室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法规和指导原则,通过CNAS/ISO9001双重质量体系认证,建立了完备的质量体系,数据冷热/异地备份,设备定期计量/期间核查,软件审计追踪,为客户提供一体化解决方案和技术服务,支持新药研发、药物申报注册和生产放行。

1.公司采用ISO9001质量控制体系,专业提供以质谱为基础的CRO检测分析服务;

2.获国家CNAS实验室认可,为客户提供符合全球药政法规的药物质量研究服务;

3.业务范围覆盖蛋白质组学、多肽组学、代谢组学、生物药物表征、单细胞分析、单细胞质谱流式、生信云分析以及多组学生物质谱整合分析等;

4.七大质量控制检测平台,满足您一站式服务需求;

5.服务3000+企业,10000+客户的选择;

6.致力于为您提供优质的生物质谱分析服务!

 

 

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